快速 DNA 连接试剂盒

100

sufficient for 40 reactions (DNA ligation)

Roche

dry ice

−20℃

1个试剂盒包含3种组分。

快速DNA连接试剂盒包含连接必需的所有试剂。不需要其他试剂或添加剂。该试剂盒能够在+15到+25℃条件下，快速链接DNA平末端或粘性末端。按照反应体系中DNA浓度，连接产物可能是环状(如果DNA浓度较低)或多联体(如果DNA浓度高)。连接的DNA适合直接用于转化实验

注意：连接后再使用高纯度^®PCR产物纯化试剂盒，可以进行电穿孔实验。

平末端或粘性末端DNA(≤200 ng)。
热失活：65℃，10分钟(T4连接酶)
如果连接反应混合物要用非转化实验的其他实验，要使T4连接酶失活。
注意：转化实验前将连接反应混合物热失活会引起转化克隆数大量下降(>因素20)。
星活性： 必须避免星活性。当进行双酶切时容易出现星活性。查询Roche现实性内切酶公告(或Roche应用科学目录)，选择特定酶组合最合适的缓冲液。可能的话，双酶切使用缓冲液H。

快速DNA连接试剂盒共价连接粘性末端或平末端DNA片段，从而：

• 克隆进质粒或噬菌体载体。
• 在质粒或其他DNAs上加接头。
• 重新环化线性DNA。

孵育时间：5分钟
DNA连接摩尔比例：标准连接反应中，载体DNA和插入DNA摩尔比例一般为1:3。然而，只要适合，你也可以使用其他比例。比如：
如果两条DNA长度差异大，可以尝试1:1或1:2比例
如果两条DNA是平末端，尝试1:5比例

新快速DNADephos & 连接试剂盒包含了所有快速DNA连接试剂盒试剂，外加我们的新快速碱性磷酸酶。

High Pure is a registered trademark of Roche

组份不可单独销售
Dilution Buffer 5x concentrated
T4 DNA Ligation Buffer 2x concentrated
T4 DNA Ligase 5 U/μl

12 - Non Combustible Liquids

WGK 1